一、原理：蛋白质分子 在一定的PH条件下，由于基团解离而带有一定的电荷，在含有缓冲液的醋酸纤维薄膜上，受电场作用而以一定的速度向一定的方向移动。不同的蛋白质分子，由...
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SDS-PAGE测定蛋白质分子量及多酚氧化酶的纯度鉴定
一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺 凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴...
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双向电泳细胞样品与组织样品处理方法
一、培养细胞(culture Cell )样品处理方法：培养动物组织细胞由于没有细胞壁，因此可以将细胞收集下来，直接加入裂解缓冲液(Lysis buffer)抽提总...
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完整的双向电泳操作流程
一、第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT，不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管)，置室温溶解。2. 在小管中加入0....
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双向电泳的样品的制备原则、步骤及注意事项
样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步，将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法，尽管处理方法多种多样，但都遵循几个基本的原则：1....
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琼脂糖（Agarose）的特性知多少
学生物的人对琼脂 、琼脂糖这两个词一定都不会陌生。不过它们是同一样东西抑或有所差别呢?我想不少人都会犯迷糊了。没关系，且听我细细讲来。首先，琼脂 和琼脂糖不光中文叫...
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预制胶——轻松应对蛋白电泳
现在，聚丙烯酰胺 凝胶电泳 (PAGE)已经成为实验室的最常规实验了。不过可别小看了这个实验，它比核酸电泳可复杂多了，需要准备的试剂多，耗时也长，而且每一次跑出来结...
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经典双向电泳操作步骤指导大全
水化上样( 被动上样)1. 从冰箱中取出 IPG 胶条，室温放置 10min。2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品，槽两端各 1cm 左右不加样，中间的样品液...
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SDS-PAGE实验试剂配制和操作方法
试剂：1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，1...
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完美SDS-PAGE胶的干燥方案
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用...
