生物知识 RT-PCR PROTOCOL RT-PCR PROTOCOL材料与方法…………………………………………………………1 .材料 ………………………………………………………1.1 供试用组织( 细胞... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物设计重点考虑因素、设计技巧及引物设计软件推荐 我最近合成了几十对引物,,在实战中多多少少有些心得,拿出来给大家分享。我感觉想把引物合成的比较好,除了前引物和后引物的Tm不能相差太大,我们还要重点考虑以下因素:一... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RACE PCR简介 近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题 PCR产物的电泳检测时间一般为48 h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48 h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有: ①模板核酸的制... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何提高PCR产物克隆的效率 把PCR产物克隆到载体上常见有3种做法:1. 直接克隆到T载体(或者U载体上)2. 引物设计时引入酶切位点,PCR产物酶切后直接克隆到目标载体上3. 将平末端PCR... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR clean up Following PCR, you often want to get rid of the PCR primers and Taq polymerase bef... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 Real-Time PCR Quantification Using Cloned Standards and Multiple Housekeeping Genes Quantitative real time PCR (QRT-PCR) has become one of the most widely used method... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物(primers)设计知识介绍 引物(primers)引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。引物的... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 SSCP检测SNP原理,步骤及常见问题总结整理 SSCP原理:sscp称为单链构象多态性,它是基于DNA构象来检测PCR产物单链碱基微小差异的方法,因其检测敏感,快速和所需装置简便而在分子生物学各个领域广泛应用。... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 用PCR进行基因分型 与许多一次做数百块Southern blots的研究人员一样,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)时觉得见效很快,不再需要等几天才能看到结果,不再需要... 05月10日 发表评论 阅读全文