生物知识 RT-PCR实验步骤 实验材料:水稻叶片的 RNA 。实验原理:目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板,对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR 的... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA 提取策略及RT-PCR技术 第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以不管... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 逆转录-聚合酶链反应实验方法 逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 实时荧光定量PCR 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR在基因表达(gene expression)检测中的应用 基因表达的检测方法基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 最新的GoTaq®两步法RT-qPCR系统 凭借新的GoTaq®两步法RT-qPCR系统,Promega提高了RNA定量的灵敏度 Madison, WI USA. (2010年8月10日) Promega新的... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR实验方法简介 RT-PCR定义:是指对组织或细胞的总RNA进行抽提,把RNA反转录为cDNA,然后设计目的基因引物进行PCR,琼脂糖电泳并数码拍照,分析电泳条带灰度值,判断目的基... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR引物的选择 随机引物适用于长的或具有发卡结构的RNA.适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。Oligo dT适用于具... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR实验方法总结 RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR反应液调制及反应设置 一、按下列组成在PCR 反应管中调制反应液ReagentQuantity,for 50µl of reaction mixture10×One Step RNA P... 05月10日 发表评论 阅读全文