PCR技术自1983Mullis发明以来，给生命科学带来了历史性的变化，现已成为分子遗传学、基因组测序和作图、法医学、系统动物学等各领域内不可缺少的工具。但是，普通...
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荧光PCR法检测RNasin性能效果
实验目的：对RNasin性能效果进行检测及评估。 实验材料及设备：模板RNA：大鼠肌肉组织RNA 引物：Rat β-acting：Forward CCCATCTAT...
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PCR常见问题分析及对策
问题1：无扩增产物现象：正对照有条带，而样品则无原因：1.模板:含有抑制物，含量低 2.Buffer对样品不合适 3.引物设计不当或者发生降解 4.反应条件：退火温...
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实时定量PCR探针概述
实时定量PCR (qPCR)的优势•实时检测PCR反应过程•精确计算出每个循环的PCR产物量•扩增和检测同时进行•消除后续PCR的干扰在实时定量PCR反应中，杂交探...
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qPCR就是这么任性
去年我一直在跟qPCR、逆转录和SYBRGreen QPCR反应做斗争，其中遇到了不少困难，现在已经告别当初的迷茫。当时在我艰难摸索的时候就想，等我都学会了，我一定...
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聚合酶链式反应（PCR）详细步骤
一、准备工作1、实验器具与材料：（1）移液枪：200ul、10ul（2）吸头：200ul、20ul（3）吸头台：放置200ul和20ul的吸头一个（4）EP管1.5...
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PCR产物的直接纯化原理、材料与方法
一．原理PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的...
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PCR常见问题汇总
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有 ①模板核酸的制备，...
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T-RFLP技术的优缺点
T-RFLP（末端限制性片段长度多态性）该技术在应用的过程中，肯定需要在实验条件上不断进行改进，而这种改进的好坏自然而然需要实验结果的验证。V. Grüntzig在...
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抑制消减杂交SSH步骤
一、cDNA第一链的合成1、在0.5ml经DEPC处理过的离心管中分别加入tester和driver的mtRNA各2ug，然后加入1ul（10uM） 随机引物（9m...
