一、实验目的学习使用DNA胶回收试剂盒回收、纯化琼脂糖凝胶中的DNA片段，掌握回收、纯化原理和实验操作。二、基本原理DNA片段的回收和纯化是基因工程操作中的一项重要...
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菌落PCR（Colony PCR）方法
菌落PCR（Colony PCR）可不必提取基因组DNA，不必酶切鉴定，而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，省时少力。建议使用载体上的通用引物。通...
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PCR技术：反向PCR技术
描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法，使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩 增大...
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增加PCR特异性：引物设计、退火温度、递减PCR、引物浓度纯度和稳定性、热启动
1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导...
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AFLP分子标记技术及其应用
（北京师范大学生命科学学院生态学专业）摘 要：扩增片段长度多态性 (AFLP，Amplified restriction fragment polymorphism...
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随机引物PCR技术
聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）简称PCR，它是一种DNA体外扩增技术。1985年美国的Mullis等人发明了PCR技术，在体外...
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ISSR分子标记的实验原理及操作流程
ISSR（inter-simple sequence repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标...
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PCR技术：mRNA差异PCR技术
生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因，而主 基因在某个特定的细胞中，只有占15％的一小部分表达。而...
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PCR反应体系
1．缓冲液 标准的缓冲液含 10mM Tris·HCl ， pH 为 8.3-9.0（室温），而在延伸温度（72 ℃）下，pH 值接近 7.2 。缓冲液中含有一种二...
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PCR技术：制备PCR反应模板
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计，酶的质量.模板的制备，在前二者都稳定可行的情况下，PCR模板的制备尤为重要.模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能，决...
