AAT Bioquest：细胞死亡与细胞周期检测

一．凋亡与坏死检测

在生命科学的浩瀚海洋中，细胞凋亡与坏死的研究犹如一颗璀璨的明珠，吸引着无数科研工作者的目光。AAT Bioquest 作为一家专业的生物试剂供应商，凭借其卓越的产品和服务，成为了这一领域不可或缺的重要伙伴。

细胞凋亡，也称为程序性细胞死亡，是多细胞生物胚胎发育和组织稳态维持的关键环节。处于凋亡过程中的细胞具有一系列独特的形态学变化和依赖能量的生化机制特征，如细胞膜起泡、细胞收缩、半胱天冬酶级联反应激活、染色质凝聚以及 DNA 片段化，还会产生膜包裹的凋亡小体。由于没有任何单一参数能够完全定义凋亡，因此在细胞死亡的研究中，我们经常采用了多种不同的方法。

AAT Bioquest 拥有丰富多样的凋亡试剂和检测方法，能够测量多种凋亡标志物，包括：

※Annexin V 检测试剂盒

※半胱天冬酶活性检测试剂盒

※TUNEL 检测试剂盒

※线粒体膜电位（ΔΨm）指示剂

※谷胱甘肽监测试剂盒

表 1：用于检测凋亡和坏死的产品

二．细胞周期检测

细胞周期是细胞生命活动的核心过程之一，其调控机制的研究对于理解细胞生长、分化、衰老以及疾病发生发展具有重要意义。AAT Bioquest 作为全球领先的生物试剂供应商，凭借其卓越的产品和技术，为细胞周期检测提供了全面而高效的解决方案。

流式细胞术检测细胞周期：精准洞察细胞生命进程

流式细胞术通过测量细胞内DNA含量来评估DNA倍体水平，并确定细胞群体处于细胞周期不同阶段的百分比。在细胞群体中，细胞在细胞周期的主要阶段（G0/G1、S 和 G2/M）的分布是基于它们的DNA含量差异。通过使用与DNA结合的荧光染料，这些染料的发射信号与每个细胞中的DNA含量成正比，流式细胞术分析可以生成频率直方图，从而估算每个细胞周期阶段的细胞百分比。细胞周期分析可用于研究肿瘤行为，检测生长模式的变化，监测凋亡，并评估各种药物对细胞周期进程的影响。

活细胞周期检测：实时追踪细胞动态

AAT Bioquest 的 Cell Meter 荧光活细胞周期检测试剂盒为监测活细胞、透化细胞和固定细胞的细胞周期进程提供了一种简单而灵敏的方法。每种试剂盒均含有专利的膜渗透性、非荧光、DNA 选择性染料。这些染料与 DNA 结合后，会发出与每个细胞中 DNA 含量成正比的荧光信号。通过流式细胞术分析染色细胞群体，可以生成频率直方图，提供有关细胞周期主要阶段相对百分比的信息。

Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒选择指南：

这些试剂盒中的 DNA 染料设计用于匹配标准激光线的主要波长。Nuclear Violet（试剂盒 22845 的 DNA 染料成分）非常适合 405 nm（紫色）激光线，但也可以被 355 nm（紫外）激光激发。Nuclear Green LCS1（试剂盒 22841 的 DNA 染料成分）和 Nuclear Red CCS2（试剂盒 22860 的 DNA 染料成分）非常适合 488 nm（蓝色）激光线。Nuclear Red CCS2 还可以使用 532 nm（绿色）激光线激发。除了方便使用外，这些非细胞毒性的核 DNA 染料还可以与额外的活细胞应用进行多重检测，包括免疫表型分析、GFP 细胞分析、流式细胞术分选、CFSE 细胞追踪和凋亡亚 G1 期群体分析。这些核 DNA 染料还以 0.5 mL 单独试剂的形式提供，并有多种其他荧光发射形式，包括 Nuclear Yellow（Ex/Em = 368/501 nm，17539）、Nuclear Orange LCS1（Ex/Em = 512/554 nm，17541）、Nuclear Red LCS1（Ex/Em = 622/645 nm，17542）和 Nuclear Red LCS2（Ex/Em = 651/681 nm，17545）。

固定细胞周期检测：经典方法与创新结合

对于固定细胞周期分析，AAT Bioquest 提供了适用于流式细胞术的 Cell Meter 荧光固定细胞周期检测试剂盒（22842），以及经典的细胞周期染料，如 DAPI（17511）、碘化丙啶（17515）和 7-AAD（17501）。试剂盒 22842 中的染料成分 Nuclear Red CCS1 是一种膜不渗透性、蓝色激光激发的 DNA 染料。在固定细胞中与 DNA 结合时，Nuclear Red CCS1 会显著增强荧光，其信号强度与每个细胞中的 DNA 含量成正比。由于 Nuclear Red CCS1 还会与 RNA 结合，因此需要使用 RNase A 处理（试剂盒成分 B）进行 DNA 含量分析。Nuclear Red CCS1 的峰值发射约为 618 nm，可以使用 PE-Texas Red 的相同滤光片进行检测，例如 610/20 带通滤光片。

Cell Meter 荧光法固定细胞周期检测试剂盒：

经典细胞周期染料：可靠的选择 

用于细胞周期分析的常见核酸染料包括 Hoechst 33258（17520、17523、17525）、Hoechst 33342（17530、17533、17535）、DAPI（17507、17510、17511、17513）、PI（17515、17516、17517）和 7-AAD（17501）。Hoechst 染料和 DAPI 是 UV 激光激发染料，发射波长约为 460 nm，而 PI 和 7-AAD 则利用常见的 488 nm 激发源，发射波长分别为 618 nm 和 648 nm。在这些经典染料中，Hoechst 33342 和 Hoechst 33258 适用于活细胞周期分析，尽管据报道 Hoechst 33258 的细胞渗透性较低。然而，使用 DAPI、PI 或 7-AAD 进行细胞周期分析时，需要对细胞进行固定和透化处理。对于像 PI 这样非 DNA 特异性的染料，它还会染色其他双链核酸，如 RNA，因此在进行 DNA 含量分析时需要使用 RNase A 处理。

经典的细胞周期染料选择指南：