AAT Bioquest：细胞器荧光探针

一．线粒体

线粒体是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷（ATP）的主要场所，为细胞的活动提供了能量，细胞生命活动所需的能量95％来自线粒体。除了为细胞供能外，线粒体还参与诸如细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程，并拥有调控细胞生长和细胞周期的能力。因此，线粒体、线粒体膜等检测是研究细胞必不可少的一部分。

可用产品类型：

MitoLite 染料

Cell Navigator 线粒体染色试剂盒

线粒体膜电位

MitoLite 染料

MitoLite 试剂是细胞可渗透的阳离子染料家族，用于标记活细胞的线粒体。这些染料很容易穿过活细胞膜并通过线粒体膜电位（ΔΨm）梯度选择性地积聚在线粒体中。MitoLite 染料的荧光颜色范围从蓝色到近红外，以适应与其他荧光探针的多路复用或固定后进行共定位研究。固着后的保留在MitoLite 试剂之间有所不同，固着后MitoLite Blue FX490等染料可以很好地保留。

MitoLite 染料特点

· 高信噪比的明亮荧光

· 高光稳定性可稳定产生信号

· 无需冲洗即可成像

· 可与其他荧光染料多路复用

· 适用于增殖和非增殖细胞

· 适用于悬浮细胞和贴壁细胞

MitoLite 染料选择指南

	MitoLite FX490	MitoLite FM	MitoLite EX488	MitoLite EX405	MitoLite FX570	MitoLite FX600	MitoLite CMXRos
应用	活细胞或固定细胞中线粒体的荧光成像
目标	通过线粒体膜电位选择性地积累和标记线粒体
Ex / Em（纳米）	343/467	507/527	507/527	423/519	552/575	579/597	579/599
过滤器组	DAPI	FITC	FITC	FITC	TRITC	TRITC	Texas Red
活细胞	是	是	是	是	是	是	是
固定细胞	没有	是	没有	没有	没有	没有	没有
可固定	是	没有	没有	没有	是	是	是
规格	500Tests	10x50ug	500Tests	500Tests	500Tests	10 x 50ug	500Tests
货号	22674	22695	22675	22679	22676	22698	22677

Cell Navigator 线粒体染色试剂盒

Cell Navigator 线粒体染色试剂盒将MitoLite 试剂增强的染色效率与优化的染色方案结合在一起，可以快速标记活细胞中的线粒体。每个试剂盒提供足够的材料来进行500次测定。Cell Navigator 线粒体染色试剂盒可轻松适用于各种荧光平台，例如微孔板检测，免疫细胞化学和流式细胞仪。它们在多种研究中均有效，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞生存力，细胞凋亡和细胞毒性。

线粒体选择性探针和试剂盒产品：

产品名称	货号	规格
MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580	16052	500Tests
Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒	16055	200Tests
Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒	16060	200Tests
线粒体膜电位荧光探针JC-1	22200	5mg
线粒体膜电位荧光探针JC-1	22201	50mg
线粒体膜电位荧光探针JC-10 JC-1的代替品	22204	5x100ul
线粒体膜电位荧光探针10-壬基吖啶橙溴化物	22205	25mg
线粒体膜电位荧光探针罗丹明B，乙酯，高氯酸盐	22211	10mg
Cell Navigator 线粒体标记试剂盒蓝色荧光	22665	500Assays
MitoLite 线粒体蓝色荧光探针	22674	500Tests
Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒适合微孔板检测	22800	500Tests
Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒适合于流式细胞仪	22970	100Tests
ReadiPrep 线粒体/细胞质分级试剂盒	60005	50Tests

二．溶酶体

溶酶体是细胞消化细胞质中不需要的物质和细胞碎片的“废物处理”系统。这些膜包围的细胞器的大小从0.1μm到1.2μm不等，包含各种水解酶，可以水解多种生物分子，包括蛋白质，肽，核酸，碳水化合物和脂质。与微碱性的细胞质溶胶（pH 7.2）相比，溶酶体的酸性内部pH为?4.8。通过质子泵和氯离子通道将质子从细胞溶质中泵入穿过膜，从而保持此pH差。已知溶酶体包含60多种不同的酶，而这种酸性pH值对于这些水解酶的佳活性至关重要。

可用产品

· LysoBrite 染料

· Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒

· Cell Meter 自噬分析

LysoBrite 染料选择指南：

	LysoBrite 蓝色	LysoBrite 绿色	LysoBrite 橙色	LysoBrite 红色DND-99	LysoBrite 红色	LysoBrite 深红色	LysoBrite NIR
Ex / Em（纳米）	432/479	500/509	542/564	573/592	575/595	595/618	634/649
过滤器组	DAPI	FITC	TRITC	TRITC	TRITC	Texas Red	Cy5
活细胞	是
固定细胞	没有
可固定	是
多路复用	是
方法	荧光成像
规格	500Tests	500Tests	500Tests	500Tests	500Tests	500Tests	500Tests
货号	22642	22643	22644	22647	22645	22646	22641

Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒：

Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒将LysoBrite 染料增强的染色效率与优化的染色方案结合在一起，可以快速标记活细胞中的溶酶体。每个套件中包含的材料足以执行500个测试。Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒可轻松适应各种荧光成像平台，并在多种研究中有效，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞生存力，细胞凋亡和细胞毒性。

Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒产品：

Cat#	产品名称	规格
22651	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒激发波长为405 nm的绿色荧光	500Tests
22652	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒* NIR荧光*	500Tests
22655	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒蓝色荧光	500Tests
22656	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒绿色荧光	500Tests
22657	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒橙色荧光	500Tests
22658	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒红色荧光	500Tests
22659	Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒深红色荧光	500Tests

Cell Meter 自噬成像试剂盒：

自噬是一种自然且受调节的溶酶体降解途径，对细胞活力，发育和体内稳态至关重要。细胞的破坏机制是降解和回收不必要或功能失调的细胞成分。它通过将靶向细胞质材料隔离到称为自噬体的双膜结合细胞器中来实现。这些自噬体随后与溶酶体细胞器融合，以使它们的内容物被溶酶体酶消化和再循环。自噬是一种保护机体免受各种疾病侵害的适应性机制。为了研究自噬在细胞稳态中的作用，已经开发了成像工具和测定法来监测自噬功能，以响应细胞应激，微生物感染和疾病。

Hoechst 33342.png

图1.通过自噬在HeLa细胞中诱导自噬Green 标记的囊泡。将HeLa细胞在常规DMEM培养基（左：对照）中或在含有5％血清的1X HBSS缓冲液中（右：自噬处理）孵育16小时。对照细胞和饥饿细胞均在37°C，5％CO 2培养箱中与Autophagy Green 工作溶液一起孵育20分钟，然后用洗涤缓冲液洗涤3次。立即在带有FITC通道（绿色）的荧光显微镜下对细胞成像。细胞核用Hoechst 33342（货号17530，蓝色）染色。

溶酶体和自噬染色探针和试剂盒产品：

产品名称	货号	规格
RatioWorks PDMPO葡聚糖检测溶酶体Ph	21211	1mg
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针	22641	500Tests
LysoBrite 溶酶体蓝色荧光探针	22642	500Tests
LysoBrite 溶酶体绿色荧光探针	22643	500Tests
LysoBrite 溶酶体橙色荧光探针	22644	500Tests
LysoBrite 溶酶体红色荧光探针	22645	500Tests
LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针	22646	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒绿色荧光 405nm激发	22651	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒近红外荧光	22652	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒蓝色荧光	22655	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒绿色荧光	22656	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒橙色荧光	22657	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒红色荧光	22658	500Tests
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒深红色荧光	22659	500Tests

三．内质网

内质网（ER）是在大多数类型的真核细胞中发现的细胞器。它由扁平的，膜包裹的囊或小管的互连网络组成，这些囊或小管从核膜延伸到整个细胞质。ER有两种类型：粗糙内质网（RER）和光滑内质网（SER）。面向细胞质的RER涂有负责蛋白质合成的膜结合核糖体。SER缺少这些核糖体，其关键功能是脂质合成，类固醇激素的产生和排毒。这些ER配合物共同负责蛋白质分子的折叠，蛋白质从ER膜到高尔基体的转运，磷脂和类固醇的合成以及钙离子在ER中的存储以及它们在细胞质中的调节释放。

用于活细胞染色的ER Tracer 染料：

ER Tracer 染料是一系列可透过细胞的染料，对活细胞的内质网染色具有高度选择性。作为我们Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒中的关键成分，ER Tracer 染料可以与其他荧光蛋白和探针多重结合，以在活细胞中或固定后进行多参数分析以进行共定位研究。

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒的特点：

· 对ER的选择性高于其他细胞，例如线粒体

· 固定细胞后ER染色保持良好

· 提供蓝色，绿色和红色荧光，以利于与其他荧光染料或蛋白质多路复用

· 适用于增殖和非增殖细胞

· 试剂盒包括强大的染色方案和足够的材料，可进行100次检测

产品选择指南：

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒
颜色	ER Tracer 蓝色	ER Tracer 绿色	ER Tracer 红色
应用	活细胞中ER的荧光成像
目标	内质网
Ex / Em（纳米）	344/456	503/511	589/620
过滤器组	DAPI	FITC	Texas Red
活细胞	是	是	是
固定细胞	没有	没有	没有
可固定	是	是	是
平台	影像学	影像学	影像学
单位大小	100Tests	100Tests	100Tests
货号	22634	22635	22636

四．细胞质膜

质膜是一种薄的半透膜，它将所有细胞的内部与其细胞外环境隔开。它由一个磷脂双层构成，该双层中嵌入了负责执行特定膜功能的蛋白质，例如离子通道，载体蛋白质和受体蛋白质。质膜为所有细胞提供结构支持和保护，并有助于多种细胞功能。它负责维持离子稳态，促进细胞可渗透离子和有机分子在细胞内外的移动，并且是细胞粘附，细胞间通讯离子传导性和细胞信号通路中不可或缺的组成部分。

Cellpaint 细胞质膜染料

Cell Navigator 细胞血浆膜染色试剂盒利用我们的Cellpaint 染料对质膜进行快速，均匀的染色，而没有荧光凝集素表现出的细胞类型差异。它们可用作高含量筛选（HCS）的分割工具，或用于细胞质膜染色以进行标准荧光显微镜检查。用甲醛固定后，还可以保持细胞膜上的荧光染色，从而可以与其他荧光染料或蛋白质多路复用。

Cell Navigator 细胞质膜染色试剂盒的优势：

· 高信噪比的明亮荧光

· 高光稳定性可稳定产生信号

· 适用于对悬浮或附着的活细胞中的质膜染色

· 广泛的哺乳动物细胞类型的质膜均匀染色

· 固定后在质膜上染色良好

· 提供绿色，橙色和红色荧光，以促进多色染色

产品选择指南

Cell Navigator 细胞血浆膜染色试剂盒
探针	Cellpaint 绿色	Cellpaint 橙色	Cellpaint 红色
应用	活细胞质膜的荧光成像
目标	质膜
Ex / Em（纳米）	497/505	555/573	648/671
过滤器组	FITC	TRITC	Cy5
活细胞	是	是	是
固定细胞	没有	没有	没有
可固定	是	是	是
多路复用	是	是	是
平台	影像学	影像学	影像学
规格	500Tests	500Tests	500Tests
货号	22682	22680	22681

产品信息：

产品名称	货号	规格
细胞膜荧光探针DiA	22030	25mg
细胞膜荧光探针DiD标记液	22033	10mL
细胞膜荧光探针DiD,高氯酸盐	22034	25mg
细胞膜荧光探针DiIC12(3),高氯酸盐	22035	25mg
细胞膜荧光探针DiOC2(3),碘化物	22038	25mg
细胞膜荧光探针DiOC3(3),碘化物	22039	25mg
细胞膜荧光探针DiOC7(3),碘化物	22040	25mg
细胞膜荧光探针DiIC12(3)-DS	22050	5mg
Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒橙色荧光	22680	500Tests
细胞膜荧光探针BSB	23050	5mg

五．细胞核

核是仅在真核细胞中发现的膜结合细胞器。它包含细胞的大部分遗传物质，只有一小部分线粒体DNA被组织为多个长线性DNA分子，并与多种蛋白质（例如组蛋白）复合形成染色体。原子核通过调节基因表达来维持基因的完整性并控制细胞过程。组成细胞核的主要结构是核被膜（一种将整个细胞器封闭并将其内容与细胞质隔离的双层膜）和核基质（在细胞核内的一个网络，它增加了机械支持，就像细胞骨架一样）。

可用产品

· 细胞渗透型核染料

· 细胞非渗透型核染料

细胞渗透性核染料

细胞渗透性核染色剂可用于标记具有健康完整细胞膜的活细胞，以及具有受损膜（例如死亡，固定或通透性细胞）的细胞。这些染料的总体毒性相对较低，对细胞功能的影响极小，从而可以在发育和细胞过程（如有丝分裂和减数分裂）的阶段跟踪活细胞，或作为活细胞中合适的复染剂。细胞渗透性核酸染色剂的例子包括Hoescht染色剂，Nuclear Violet TM LCS1，Nuclear Green TM LCS1，Nuclear Orange TM LCS1和Nuclear Red TM LCS1 / LCS2。

细胞可渗透核染料的选择指南：

	Hoechst 33342	核紫罗兰LCS1	核黄	核绿 LCS1	核橙 LCS1	核红 LCS1	核红 LCS2
Ex / Em（纳米）	350/451	400/458	368/501	501/526	512/554	651/681	651/681
过滤器组	DAPI	DAPI	FITC	FITC	TRITC	Cy5	Cy5
活细胞	是
固定细胞	是
多路复用	是
平台	成像，荧光微孔板或流式细胞仪
规格	5ml	0.5ml	25mg	0.5ml	0.5ml	0.5ml	0.5ml
货号	17535	17543	17539	17540	17541	17542	17545

细胞非渗透型核染料

不可渗透细胞的核染料可用于用受损的质膜标记细胞核，例如死的，固定的或通透的细胞。由于不渗透细胞的核酸染料无法标记活细胞，因此它们通常在细胞活力测定中用作死细胞指示剂，或在免疫标记应用中用作核复染。细胞不渗透性核酸染料的实例包括DAPI，碘化丙啶（PI），7-氨基放线菌素D（7-AAD），nuclear blue DCS1，nuclear green DCS1，nuclear orange DCS1和nuclear red DCS1。

细胞非渗透型核染料选择指南：

	DAPI	核蓝 DCS1	核绿 DCS1	核橙 DCS1	PI	7-AAD	核红 DCS1
Ex / Em（纳米）	357/457	344/465	501/526	512/554	534/617	547/648	651/681
过滤器组	DAPI	DAPI	FITC	TRITC	Texas Red	Cy5	Cy5
活细胞	没有
固定细胞	是
多路复用	是
平台	成像，荧光微孔板或流式细胞仪
规格	10mg	0.5ml	0.5ml	0.5ml	1ml	1mg	0.5ml
货号	17510	17548	17550	17551	17517	17501	17552

产品指南：

产品名称	货号	规格
细胞核染料 Hoechst 33258	17520	100mg
细胞核染料Hoechst 33258	17523	1g
细胞核染料Hoechst 33258 20mM水溶液	17525	5mL
细胞核染料Hoechst 33342	17530	100mg
细胞核染料Hoechst 33342	17533	1g
细胞核染料Hoechst 33342 20mM水溶液	17535	5mL
死细胞核染料 TWO-PRO 1 相当于TO-PRO 1	17571	0.2mL
死细胞核染料 TWO-PRO 3 相当于TO-PRO 3	17572	0.2mL
死细胞核染料 DiTO -1 1 mM DMSO溶液相当于TOTO -1	17575	0.2mL

热门产品染色结果展示：

使用MitoROS OH580（Cat＃16055）在HeLa细胞中测量羟基自由基的荧光图像。将HeLa细胞与MitoROS OH580工作溶液在37°C下孵育1小时，然后用HHBS洗涤一次。Fenton反应：然后在37°C的1X HBSS缓冲液中，用10 ?M CuCl2和100 ?M H 2 O 2处理细胞1小时。对照：HeLa细胞未经处理即可保存在1X HBSS缓冲液中。用HHBS洗涤3次后，使用带有TRITC滤光片组（红色）的荧光显微镜测量HeLa细胞。细胞核用Hoechst 33342（Cat＃17530，蓝色）染色。

Cell Navigator.png

在Costar黑色墙壁/透明底部96孔板中，用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像。

使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜在96孔黑壁透明底板中培养的HeLa细胞中内质网（ER）染色的荧光图像。左：活细胞用ER选择性探针ER Green （Cat＃22635，绿色），线粒体染料MitoLite Red FX600（Cat＃22677，红色）和细胞核Hoechst 33342（Cat＃17530，蓝色）染色。右：用ER Green （Cat22635，绿色）染色的活细胞用4％甲醛固定，并用F-肌动蛋白染料iFluor 594-鬼笔环肽（Cat＃23122，红色）和细胞核DAPI（Cat＃17507，蓝色）标记。