重磅!Abnova新冠病毒中和抗体ELISA检测试剂盒上新啦

 

【前情回顾】Abnova实力上新–靶向新冠病毒S蛋白的中和抗体

 

新冠病毒(COVID-19)有四种主要的结构蛋白:刺突蛋白(Spike protein,S蛋白),核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N蛋白),膜蛋白(Membrane protein,M蛋白),包膜蛋白(Envelope protein,E蛋白)。刺突蛋白S蛋白有两个亚基:S1和S2,其中受体结合位点(RBD)位于S1亚基上。COVID-19通过RBD与ACE2的结合介导进入细胞内部,因此阻断病毒RBD和人ACE-2的特异性结合是潜在重要的治疗方向之一 !说到这里就又不得不提到中和抗体了。

 

刺突蛋白

 

新冠病毒中和抗体可以特异性识别并且结合新冠病毒的RBD位点,抢先阻止病毒与人ACE-2结合,直接阻断病毒的进一步感染。

 

新冠病毒中和抗体

 

Abnova全新推出的COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒利用竞争法ELISA原理,当样本中存在中和抗体时与刺突RBD蛋白结合,从而阻止了RBD与预包被板底的ACE2蛋白的结合,用于新冠病毒中和抗体的定量检测。

货号 名称 样本
KA6111 COVID-19 Neutralizing Antibody ELISA Kit
新冠病毒中和抗体定量检测试剂盒
人/小鼠血清和培养上清液

 

实验步骤:

  1. 将100ul2 ug/ml ACE2加入至每孔,4℃孵育过夜;
  2. 第二天,50 ul稀释好的样本+50ul 刺突RBD蛋白混合后,室温孵育2h;
  3. 包被后,移除孔中的ACE2蛋白,加入稀释好的封闭液,室温封闭1h;
  4. 移除孔中的封闭液,用200ul wash buffer洗涤一次;
  5. 将孵育好的样本+刺突RBD蛋白混合液100ul加入孔中,37℃孵育2h;
  6. 移除孔中的样本-刺突RBD蛋白混合液,用200ul wash buffer洗涤,洗4次;
  7. 每孔中加入100ul稀释好的HRP标记的抗兔Fc标签二抗,37℃孵育1h(由于刺突RBD蛋白是带有兔Fc标签的,所以可以备该二抗特异性识别并结合);
  8. 移除孔中的二抗,用200ul wash buffer洗涤,洗4次;
  9. 向每孔加入100ul TMB显色液,轻轻混合,室温孵育5min,每孔加入100ul终止液,轻轻混合,在450 nm波长下检测吸光度。

 

竞争法ELISA

标准曲线仅用于说明目的,不应用于计算未知数。每次检测时均应做标准曲线。
(竞争法ELISA,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈负相关)
 

实验结果展示:

实验结果展示 COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒

用COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒(Cat#KA6111)进行对新冠病毒单克隆抗体(7F5、4E10和7F7)的中和测定

 

用COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒

用COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒(Cat#KA6111)对DNAx免疫的新冠病毒多克隆抗体进行中和测定。

 

用COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒

用COVID-19中和抗体ELISA检测试剂盒(Cat#KA6111)对SAM免疫的多克隆抗体进行中和测定。

 

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